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公司新闻

表达特定HLA-A分子的人B淋巴母细胞系构建成功

发布时间:2021-04-21 20:04 |  点击次数:

HMy2.CIR细胞是HLA(人类主要组织相容性抗原)I类抗原表达缺失的细胞,不表达HLA-AHLA-B分子,仅表达微量的HLA-Cw4分子。本公司从健康献血者群的PBMCs 中扩增8种特定HLA-A分子的mRNA,常规构建pcDNA3.1 重组质粒,电转HMy2.CIR 细胞株,经G418 筛选后获得稳定转染特定HLA-A重组质粒的HMy2.CIR细胞。利用FITC-anti-HLA-A2402或FITC-anti-HLA-ABC单抗进行荧光染色,然后通过流式细胞仪分选收集HLA-A2402表达阳性的细胞,扩增培养,获得稳定表达特定HLA-A分子的HMy2.CIR细胞株,阳性率达80%-95.4%左右。这8种HLA-A等位基因在中国人群中的总频率为87%左右,属优势HLA-A等位基因。该细胞可以用来进行特定HLA-A分子限制性的T细胞表位肽竞争结合实验,分析表位肽与特定HLA-A分子的亲和力;也可利用该细胞株脉冲特定HLA-A分子限制性的T细胞表位肽,作为抗原提呈细胞进行T细胞刺激实验,分析T细胞表位肽的免疫原性等。在将表位肽与表达特定HLA-A分子的HMy2.CIR细胞共孵育之前,可以用枸橼酸缓冲液先处理细胞,已洗去HLA分子肽结合凹槽中先前已经结合的多肽。该细胞已通过支原体检测和STR 检测。