肺癌抗原Cyfra21-1特异性T细胞定量检测试剂盒研制成功

Cyfra21-1是肺癌最有价值的肿瘤相关抗原之一，也是临床诊断非小细胞肺癌以及监测和评估预后复发的一种常用肿瘤标志物。本公司根据Cyfra21-1蛋白的全长氨基酸序列（400aa），通过8种T细胞表位预测数据库，虚拟预测了近两百种被13种优势HLA-A、15种优势HLA-B和14种优势HLA-C分子提呈的Cyfra21-1抗原肽，作为候选表位肽；然后收200余位肺癌患者的新鲜外周血，将PBMC细胞与候选表位肽共培养6小时，通过胞内细胞因子染色和流式分析检测PBMC中被多肽激活而分泌IFN-γ的T细胞数量，筛选在患者体内具有真实免疫原性的Cyfra21-1抗原T细胞表位肽。然后利用41种表达中国人群优势HLA-A\B\C分子的细胞株阵列进行HLA分子的多肽竞争结合实验，进一步分析每种表位肽的HLA交叉限制性，明确每种表位肽适合的人群广度。  

试剂盒的组成：利用本公司筛选所得的37种Cyfra21-1抗原的真实抗原肽组成广谱CD8+ T细胞表位肽库，其中22种抗原肽被13种优势HLA-A分子提呈，23种被15种优势HLA-B分子提呈、13种被14种优势HLA-C分子提呈，且每种抗原肽能被 2-4 种 HLA 分子交叉提呈。这些优势HLA-A、B和C分子的基因总频率分别覆盖95%，71%和93%左右的中国人群。因此，本Cyfra21-1抗原肽库符合中国最广泛人群的HLA-A\B\C基因多态性，具有中国人群普适性，并且具有Cyfra21-1表位的丰富代表性，能检测至少58种Cyfra21-1特异性CD8+ T细胞克隆。将上述37种抗原肽分成2个肽库，组装成ELISPOT试剂盒，定量检测肺癌患者外周血中处于记忆或活化状态、并且具有免疫反应活性的Cyfra21-1特异性CD8+T细胞数量。

试剂盒的临床意义：肺癌抗原Cyfra21-1特异性T细胞功能的定量检测是即时评估免疫治疗效果的精准指标，也是评估其他治疗方法前后患者特异性T细胞免疫功能变化以及判断预后的重要指标。目前国内外没有同类产品。